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安全是实验前提 规范操作是实验基础

发布时间:2021-3-12 18:55:51      点击:

  离心机在植物组织蛋白质提取中的应用讲解.

bet36最新备用平台-bet36备用主页-bet360手机版  本文讲解的提取方法是采用三氯醋酸—丙酮沉淀法,详细步骤如下:

  1、在液氮中研磨叶片

bet36最新备用平台-bet36备用主页-bet360手机版  2、加入样品体积3倍的提取液在-20℃的条件下过夜,然后离心机离心(4℃8000rpm以上1小时)弃上清。

  3、加入等体积的冰浴丙酮(含0.07%的β-巯基乙醇),摇匀后离心机离心(4℃8000rpm以上1小时),然后真空干燥沉淀,备用。

  4、上样前加入裂解液,室温放置30分钟,使蛋白充分溶于裂解液中,然后离心机离心(15℃8000rpm以上1小时或更长时间以没有沉淀为标准),可临时保存在4℃待用。

bet36最新备用平台-bet36备用主页-bet360手机版  5、用Brandford法定量蛋白,然后可分装放入-80℃备用。

  药品:

  提取液:含10%TCA和0.07%的β-巯基乙醇的丙酮

  裂解液:2.7g尿素0.2gCHAPS溶于3ml灭菌的去离子水中(终体积为5ml),使用前再加入1M的DTT65ul/ml。

  这种方法针对双向电泳,杂质少,离子浓度小的特点!当然单向电泳也同样适用,只是电泳的条带会减少!

  注意在离心机的使用过程中,都必须遵循一些安全要求:

bet36最新备用平台-bet36备用主页-bet360手机版  转鼓的强度计算应符合JB/T 8105使用范围所界定的规定,其结构及各零、部件,必须有足够的强度、刚度和稳定性。

bet36最新备用平台-bet36备用主页-bet360手机版  应保证在规定的工作条件下,运行安全可靠,并且操作维护方便,在操作人员遵守操作规程的条件下,安全防护装置应确保人身的安全。

bet36最新备用平台-bet36备用主页-bet360手机版  在按规定条件制造、安装、贮运和使用时,不得对人身安全构成威胁和造成伤害。

bet36最新备用平台-bet36备用主页-bet360手机版  离心机密闭防爆要求

  1)处于密闭、易燃、易爆环境或潮湿环境下工作的离心机,应符合密闭、防燃、防爆、防湿等有关标准或法规的要求。

  2)处于密闭、易燃、易爆环境或潮湿环境下工作的离心机,应有可靠的安全防护措施。

  上海卢湘仪离心机仪器有限公司作为经验丰富的离心机厂家,在设计制造离心机以及培训使用离心机的时候,严格按照以上要求执行!


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