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如何将讲实验室离心机训练成帮手

发布时间:2021-2-4 15:15:30      点击:

  实验室离心机用对了是“帮手”,用错了就是“杀手”!

  就拿植物dna提取来说,原理就是去掉植物细胞壁,细胞膜,质体,线粒体,叶绿体然后剩下细胞核了,这就是我们需要的DNA。

  通常采用机研磨的方法破碎植物的组织和细胞,由于植物细胞匀浆含有多种酶类(尤其是氧化酶类)对DNA的抽提产生不利的影响,在抽提缓冲液中需加入抗氧化剂或强还原剂(如巯基乙醇)以降低这些酶类的活性。在液氮中研磨,材料易于破碎,并减少研磨过程中各种酶类的作用。

bet36最新备用平台-bet36备用主页-bet360手机版  十二烷基肌酸钠、十六烷基三甲基溴化铵简称为CTAB、十二烷基硫酸钠简称SDS,等离子型表面活性剂,能溶解细胞膜和核膜蛋白,使核蛋白解聚,从而使DNA得以游离出来。再加入苯酚和氯仿等有机溶剂,能使蛋白质变性,并使抽提液分相,因核酸(DNA、RNA)水溶性很强,经离心机离心后即可从抽提液中除去细胞碎片和大部分蛋白质。上清液中加入无水乙醇使DNA沉淀,沉淀DNA溶于TE溶液中,即得植物总DNA溶液。

  虽然提取植物叶片的DNA比较简单,用下离心机再根据植物,找段基因的序列设计引物,再顺势PCR一下了,看看个能把这段基因扩出来,整个过程其实需要用的到的设备并不多,重要的就离心机跟PCR仪器。

bet36最新备用平台-bet36备用主页-bet360手机版  但是这里面需要注意的细节有很多,比如:

  使用实验室离心机的注意事项:

  1. 离心机在预冷状态时,离心机盖必须关闭,离心结束后取出转头要倒置于实验台上,擦干腔内余水,离心机盖处于打开状态。

bet36最新备用平台-bet36备用主页-bet360手机版  2. 转头在预冷时转头盖可摆放在离心机的平台上,或摆放在实验台上,千万不可不拧紧浮放在转头上,因为一旦误启动,转头盖就会飞出,造成事故!

bet36最新备用平台-bet36备用主页-bet360手机版  3. 转头盖在拧紧后一定要用手指触摸转头与转盖之间有无缝隙,如有缝隙要拧开重新拧紧,直至确认无缝隙方可启动离心机。

  4. 在离心过程中,操作人员不得离开离心机室,一旦发生异常情况操作人员不能关电源(POWER),要按STOP 。在预冷前要填写好离心机使用记录。

bet36最新备用平台-bet36备用主页-bet360手机版  5. 不得使用伪劣的离心使管,不得用老化、变形、有裂纹的离心管。

  6. 离心机套管底部要垫棉花或试管垫。

bet36最新备用平台-bet36备用主页-bet360手机版  7. 电动离心机如有噪音或机身振动时,应立即切断电源,即时排除故障。

bet36最新备用平台-bet36备用主页-bet360手机版  8. 离心管必须对称放入套管中,防止机身振动,若只有一支样品管另外一支要用等质量的水代替。

  9. 启动离心机时,应盖上离心机顶盖后,方可慢慢启动。

bet36最新备用平台-bet36备用主页-bet360手机版  10. 分离结束后,先关闭离心机,在离心机停止转动后,方可打开离心机盖,取出样品,不可用外力强制其停止运动。

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  使用PCR仪器的注意事项:

bet36最新备用平台-bet36备用主页-bet360手机版  (1)PCR仪使用的环境要恒定,工作环境的温度不能过高或过低,最好在用空调的房间使用,有些PcR仪有温度保护程序,在过低的温度下机器不能启动。

  (2)电源要稳定,工作的电压不能波动过大,波动过大会造成电子器件损坏,一般建议将PcR仪电源接于稳压电源上。

bet36最新备用平台-bet36备用主页-bet360手机版  但是要注意的是,不论是离心机还是PCR仪器,使用前都要详细阅读使用说明书,遇到不能解决的问题不要随意拆卸机器,应该让生产厂商负责售后服务的专业工程师进行处理。


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